La membrane est la porte d’entrée ou de sortie de nombreux pathogènes (bactéries, virus). Ces processus ont une temporalité précise et sont régulés spatialement à l’échelle de quelques molécules. Ainsi, mesurer la dynamique de ces constituants à la membrane de cellules vivantes lors de l’assemblage ou la pénétration de pathogènes permet d’incrémenter la compréhension de ces mécanismes. A cet effet des microscopies multimodales (temps, espace) ont été mises en oeuvre (TIRF-Im-FCS, TIRF-spt-PALM). Cependant elles souffrent de leurs faibles sensibilités. Nous nous attacherons à améliorer drastiquement cette sensibilité afin de pouvoir localiser et suivre ces molécules avec une haute précision spatiale (super-résolution) et temporelle (corrélation temporelle). Pour cela, nous utiliserons des empilements multi-diélectriques résonants déposés sur un classique support de verre de microscope adaptables aux systèmes commerciaux. L’exaltation du champ local soutenue par l’empilement permettra une forte augmentation de cette sensibilité sur toute la surface cellulaire. Nous utiliserons ce gain dans l’étude d’assemblage, molécule après molécule, de virus enveloppés, ce, à la membrane plasmique de cellules vivantes.
CpP Le Champ (proche) des Pathogènes
Résumé
Mots clés
- Assemblages de pathogènesCouches Minces Optiques.Exaltation de fluorescenceMicroscopies de corrélation temporelleMicroscopies de Molécule Unique
Partenaires du projet
INSB
Cyril FAVARD
IRIM
(UMR9004) Montpellier, France
INSIS
Aude Lereu
Institut Fresnel
(UMR7249) France